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當前位置:首頁產品中心細胞與免疫學試劑基質膠MG2237-1ml基質膠-標準型無酚紅

基質膠-標準型無酚紅
產品簡介

基質膠-標準型無酚紅,含有豐富的細胞外基質蛋白,主要包括層粘連蛋白、膠原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生長因子。

基底膠在室溫條件下,聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養和分化,以及對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。

產品型號:MG2237-1ml
更新時間:2024-12-09
廠商性質:代理商
訪問量:553
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品牌其他品牌供貨周期現貨
應用領域食品/農產品,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥

標準型基質膠-不含酚紅


貨號MG2237、MG4237、MG6237

存儲條件-80保存,避免反復凍融。


產品簡介

基質膠是從Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性細胞培養基質,含有豐富的細胞外基質蛋白,主要包括層粘連蛋白、膠原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生長因子。

基底膠在室溫條件下,聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養和分化,以及對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。基質膠也適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學研究。高濃度的基質膠可以用于動物體內成瘤實驗的細胞包被。


操作方法:

一、薄膠成膠方法:

1. 凍融后,用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。

2. 將需要使用的培養板置于冰上,加入濃度為 50μL/cm2 生長面積的基質膠。

3. 在 37℃放置 30 分鐘,即可使用。

二、厚膠成膠方法:

1. 凍融后,用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。

2. 將需要使用的培養板置于冰浴,將培養的細胞與基質膠混合,用移液槍頭使其懸浮于基質中。加入濃度為 150-200μL/cm

2 生長面積的基質膠。

3. 在 37℃放置 30 分鐘,可成膠。可以加入細胞培養的基質,也可使細胞直接生長在膠表面。

三、薄層包被方法:

1. 凍融后,用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。

2. 根據使用需要,采用無血清培養基稀釋基質膠。根據實驗需要確定最佳包被濃度。

3. 將稀釋的 基質膠包被于所需的培養器皿中,包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育 1 小時。

4. 去除未結合的基質膠,用無血清培養基輕輕地沖洗。

四、類器官培養方法:

1. 用適量的4℃過夜解凍的基質膠重懸細胞或組織沉淀,推薦重懸密度為每50μL基質膠懸液包含1X10^5細胞,重懸后可置于冰上,重懸時間不超過30s以避免基質膠過早凝固。基質膠稀釋比例應在70%以上以保證培養過程中基質膠的結構穩定性。

2. 將基質膠和組織細胞的混合懸液點入預熱的24孔板底部正中央,每孔30μL左右,避免懸液接觸孔板側壁。為防止基質膠室溫凝固,此步驟應盡快完成。

3. 將接種完成后的培養板至于 37℃二氧化碳恒溫培養箱中,孵育 15min 左右待基質膠凝固。

4. 待基質膠wanquan凝固后,沿壁緩慢加入類器官培養基,24孔板每孔 500uL,避免破壞已凝固結構。

5. 24孔板置于37℃二氧化碳培養箱中培養。

6. 3 天更換一次培養基,更換培養基時應避免破壞基質膠。

五、胚胎干細胞 ES 和誘導多能干細胞 ips 培養(推薦使用hES驗證款基質膠)

1. 在冰上解融一份分裝的基質膠。

2. 在50 mL離心管中加入24 mL的預冷的DMEM/F-12,并且放在冰上。

3. 將解融的基質膠按一定稀釋比例(如1:100)加入到預冷的 DMEM/F-12中(在50 mL離心管中),混勻。

4. 稀釋好的基質膠溶液必須立即使用,進行培養皿的包被。推薦的包被體積參見下表。

培養皿

稀釋后的基質體積

6孔培養板

1 mL/孔

10 mm培養皿

6 mL/培養皿

T-25培養瓶

3 mL/培養瓶

T-75培養瓶

8 mL/培養瓶


5. 輕輕晃動培養皿,將基質膠溶液均勻的覆蓋到培養皿的表面。

注意:如果培養皿的表面沒有被基質膠溶液wanquan覆蓋,則不能用于人ES和iPS細胞培養。

6. 培養皿使用前至少在室溫(15 - 25°C)孵育1個小時,不可使基質膠蒸發。

注意:如果不是立即使用,包被好的培養皿必須密封防止基質膠溶液的蒸發,包被后可以在2 - 8°C放置一周。在使用之前,至少在室溫(15 - 25°C)中放置30分鐘恢復到室溫。

7. 輕輕的將培養皿的一側傾斜,使多余的基質膠溶液在一側的邊緣匯聚。通過移液器或者泵吸取多余的基質膠溶液。確保包被的表面沒有被刮到。

8. 立即加入ES細胞培養基(例如,6孔板每孔2 mL)。


注意事項:

1. 收到產品并確認到貨情況無異常后,請將 基質膠儲存于--80℃冰箱,短暫使用可置于--20℃冰箱。切勿將基質膠儲存于自動除霜的冰箱中。在第一次融化后請分裝保存,應避免基質膠反復凍融。

2. 因基質膠在 10℃以上即可成膠,在操作過程中,保持基質膠一直置于冰上,所有接觸的細胞培養器皿,移液吸頭,分裝管等都必須預冷后使用。

3. 所有操作均需在無菌環境下進行,試劑瓶瓶蓋可用 70%乙醇擦拭,并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。

4. 溶解時可將基質膠基質置于 4℃冰箱內冰上過夜溶解。成膠后基質膠可以在 4℃ 24-48 小時后重新呈液態。






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