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快速內切酶EcoRI
產品簡介

快速內切酶EcoRI快速內切酶經過基因工程重組、能夠在5~15分鐘內精確完成DNA切割的高保真限制性內切酶,適用于質粒DNA、PCR產物或基因組DNA等的快速酶切。快速內切酶具有如下特點:5~15分鐘內即可完成酶切;共用一種酶切Buffer,大大簡化酶切反應體系;良好的酶活冗余度,輕松應對底物過量或困難模板酶切。

產品型號:
更新時間:2022-08-21
廠商性質:代理商
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品牌其他品牌貨號F5536S-600rxns
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EcoRI 快速內切酶


產品貨號F5536S

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同裂酶FunII

注:同裂酶對于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性。

產品組成

組分

規格

LabFD™ EcoRI

600ul

10×LabFD™ Buffer

3×1ml

10×LabFD™ Color Buffer

3×1ml

 

產品簡介

LabFD™快速內切酶是一系列經過基因工程重組、能夠在5~15 分鐘內精確完成 DNA 切割的限制性內切酶,適用于質粒 DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切。LabFD™ 快速內切酶具有如下特點:5~15 分鐘內即可完成酶切;共用一種酶切Buffer,大大簡化酶切反應體系;良好的酶活冗余度,輕松應對底物過量或困難模板酶切。此外,LABLEAD生命去磷酸化、連接試劑在LabFD™酶切Buffer 中具有baifenzhibai活性,支持一管化反應,提升“酶切-修飾-連接"的體驗。

建議的反應條件:

1× LabFD™緩沖液;

37℃溫育;

參照“DNA快速酶切流程"配制反應體系

失活條件

80℃溫育20min。

質量控制

功能活性檢測

最shi反應溫度下,在20ul反應體系中,1ul LabFD™EcoRI能夠在15min 內*消化1ug λDNA。

超長時間溫育檢測

最shi反應溫度下,將 1ul LabFD™ EcoRI 與 1ugλDNA共同溫育3h,未檢測到其他核酸酶污或星號活性引起的底物非特異性降解,延時酶切可能出現星號活性。

酶切-連接-再酶切檢測

最shi反應溫度下,使用 1ul LabFD™ EcoRI消化底物,回收酶切產物。在22℃下使用適量Fast T4 DNALigase可以將酶切產物重新連接將連接產物再次回收后,使用相同的內切酶可以重新切開連接產物。

非特異性內切酶活性檢測

最shi反應溫度下,1ul LabFD™ EcoRI與1ug超螺旋質粒DNA共同溫育4h,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,質粒DNA仍然處于超螺旋狀態。

藍白斑檢測

含有lacZα基因的載體以1ul LabFD™ EcoRI消化,重新連接后轉化入大腸桿菌感受態細胞,涂布在含有對應抗生素、IPTG 和X-gal的LB培養基平板上。連接正確的產物會生長出藍色菌落,而連接錯誤(即DNA末端切口不完整)的產物將得到白色菌落。對于LabFD™系列限制酶而言,白色菌落比例應小1%。

 

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